低分子质量肝素联合顺铂对肝癌细胞自噬的影响

目的:探讨低分子质量肝素(low molecular weight heparin,LMWH)联合顺铂(cisplatin,DDP)对BEL-7404 人肝癌细胞自噬的影响和机制.方法:用不同质量浓度的LMWH、DDP单独或联合处理肝癌BEL-7404 细胞 48 h,并分为 4 组:对照组、LMWH组、DDP组及L+D组.CCK-8 法测其对细胞增殖能力的影响;单丹磺酰尸胺荧光染色法观察自噬水平;RT-PCR检测自噬蛋白mRNA的表达;Western blotting检测自噬蛋白及通路蛋白的表达.结果:L+D组的细胞增殖能力较其他组明显下降(P<0.01),绿色荧光自噬体显著增多、自噬相关蛋白LC3Ⅱ的mRNA和蛋白表达均明显增高(P<0.01),p62 明显降低(P<0.01),P-AMPK/AMPK、P-ULK1/ULK1 以及Beclin1 的蛋白表达明显升高(P<0.05～P<0.01).结论:LMWH与DDP联合作用显著提高了BEL-7404 细胞自噬,可能是通过激活AMPK-ULK1-Beclin1 信号通路而实现.