基于HPLC指纹图谱及化学计量学筛选石楠叶质量标志物及其含量测定研究

目的:建立石楠叶药材HPLC-PDA指纹图谱,结合化学计量学识别和筛选石楠叶药材的质量标志物,为石楠叶的质量提供科学依据.方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.1％甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min-1,检测波长350 nm,柱温35℃;建立15批石楠叶药材指纹图谱并进行相似度评价,对共有峰进行化学识别模式分析区分不同产地的石楠叶药材,筛选石楠叶的质量标志物.结果:15批石楠叶药材的相似度均在0.996以上,共标定了10个共有峰,聚类分析、主成分分析和偏最小二乘分析筛选出1号色谱峰(新绿原酸)、2号色谱峰(绿原酸)、4号色谱峰(芦丁)、5号色谱峰(金丝桃苷)、6号色谱峰(异槲皮苷)为石楠叶的质量标志性成分,其中新绿原酸、绿原酸的含量与药材的优质性呈正相关,芦丁、金丝桃苷和异槲皮苷的含量可能与药材质量呈负相关,说明这3种成分在药材中含量不宜太高.进一步对以上5个成分进行定量分析,线性范围分别为:0.1353～2.7060,0.1340～2.6800,0.0085～0.1705,0.0156～0.3128,0.0059～0.1189μg,各成分线性关系良好(R2≥0.9990),平均回收率在99.30％ ～101.90％.结论:建立的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法稳定、可靠,可为石楠叶药材的质量评价提供依据.