纤维素降解菌株D2的分离鉴定及其产酶影响因素的研究

纤维素转化为可利用的物质,对于能源危机、环境污染问题的解决具有重要作用.采用羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源配制培养基,采取克氏碘液染色法从常年落叶的土壤中分离、筛选高效纤维素降解菌,并对其进行形态学观察、生理生化分析、分子生物学鉴定及产酶能力研究.结果显示,共分离出4种菌株(D2,D3,D4和D5),经克氏碘染色,发现D2菌株的纤维素降解能力最强.经形态学观察、生理生化实验和16 S rRNA基因测序分析,D2菌株被鉴定为一株芽孢杆菌(Bacillus sp.).为提高菌株D2的产酶量,对其发酵时间、接种量、发酵温度、培养基初始pH、摇床转速5个单因素进行研究.结果显示,当发酵温度为37℃,液体产酶培养基初始pH为7,接种量为3％及摇床转速为160 r/min时,菌株D2在发酵第3 d有最高产酶能力,纤维素酶(CMCase)活性为1.4562 U/mL.以上结果为纤维素资源的利用奠定了一定的基础.