基于PI3K/AKT/mTOR信号通路研究瑶药紫九牛醇提物抗小鼠肝纤维化作用

目的:基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨瑶药紫九牛醇提物的抗小鼠肝纤维化作用及机制.方法:取SPF级昆明小鼠,随机分成正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.2 mg/kg)阳性对照组及紫九牛醇提物高(生药18 g/kg)、中(生药9 g/kg)、低(生药4.5 g/kg)剂量组.除正常对照组外,其余各组小鼠均背部皮下注射25％四氯化碳(CCl4)花生油溶液,持续8 w,建立小鼠肝纤维化模型.各组小鼠在造模第一天开始灌胃给药,正常对照组和模型组小鼠以纯净水灌胃,各给药组灌胃相应药物,1次/d,连续8 w.实验结束后,检测小鼠血清ALT、AST水平;ELISA法检测肝组织COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、IL-1β、TNF-α、TGF-β1水平;制备肝组织切片,Masson染色观察肝组织病理学改变;免疫组化法(ICH)检测肝组织α-SMA表达;Western Blot检测肝组织AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达.结果:与模型组比较,瑶药紫九牛醇提物能显著降低肝纤维化小鼠血清ALT、AST水平及肝组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、IL-1β、TNF-α、TGF-β1水平(P<0.05或P<0.01);减轻肝脏组织胶原纤维增生;下调肝组织α-SMA、AKT蛋白表达及p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平(P<0.05或P<0.01).结论:瑶药紫九牛醇提物具有抗肝纤维化作用,其作用机制与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路及AKT、mTOR蛋白磷酸化有关.