灵芝HPLC指纹图谱研究及其在产地追溯中的应用

目的:建立32批4个产区灵芝的HPLC指纹图谱,为灵芝的产地追溯提供方法.方法:色谱柱采用Thermo Scirntific AcclaimTMRSLC PA2 Polar AdvantageⅡ(2.1 mm×150 mm,2.2μm),流动相:乙腈(A)-0.1％ 甲酸(B),流速0.25 mL·min-1,梯度程序(B)为:0～34 min,26.5％ ～26.5％;34～52 min,26.5％ ～38.5％;52～60 min,38.5％ ～55％;60～75 min,55％ ～90％;75～80 min,90％～20％;80～90 min,20％ ～20％,检测波长257 nm,进样量5μL.建立福建、浙江、安徽和吉林产区灵芝的指纹图谱,对色谱图进行共有峰的标识,并采用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法分析(OPLS-DA),对其进行产地溯源分析.结果:所构建的福建灵芝HPLC指纹图谱共有峰46个,其他产区灵芝HPLC指纹图谱共标识23个共有峰,聚类结果表明,当聚类距离为12时,32批样品被分为4大类,不同产地灵芝指纹图谱存在差异;进一步采用PCA与OPLS-DA,得出峰3、4、5、6、8、9、18共7个成分为主要差异成分.结论:本研究构建了4个产地灵芝的HPLC指纹图谱,结合化学计量学能够快捷、准确地应用于灵芝的产地溯源.