慢性哮喘小鼠气道重塑情况观察及发生机制探讨

目的 观察慢性哮喘小鼠气道重塑情况,并探讨其可能发生机制.方法 取小鼠16只,并随机分为哮喘组和对照组(各8只).哮喘组制备慢性哮喘模型,于第0和7天腹腔注射致敏液,第2～12周用激发液雾化激发,每2周2次,连续2 d,每次30 min;对照组采用PBS替代致敏液和激化液;比较两组小鼠肺支气管厚度变化及支气管平滑肌厚度、基底膜下胶原沉积厚度和肺组织miR-3162-3p、β-catenin蛋白、LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量.取对数生长期哮喘小鼠气道平滑肌细胞,分成两组,对照组加入PBS,Mimic组转染微小RNA 3162-3p模拟物(miR-3162-3p mimic),比较两组LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量.结果 对照组马松三色染色结果显示肺泡间隔匀称、支气管结构清晰正常;哮喘组肺组织结构不均匀,偶见支气管上皮细胞疏散,支气管平滑肌肌层肥厚,上皮下纤维化明显增多,基底膜增厚,支气管周围蓝色胶原沉积加重.与对照组比较,哮喘组支气管平滑肌厚度、基底膜下胶原沉积厚度增加(P均<0.05).与对照组比较,哮喘组肺组织miR-3162-3p、LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高,β-catenin蛋白表达降低(P均<0.05).与对照组比较,Mimic组气道平滑肌细胞LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达增加(P<0.05).结论 慢性哮喘小鼠肺支气管平滑肌显著增厚,基底膜下的胶原纤维明显沉积,其发生机制可能是miR-3162-3p通过下调β-catenin蛋白表达促进气道平滑肌细胞自噬水平上调.