EPO对窒息诱导新生大鼠脑损伤和CoCl2诱导人脑胶质瘤细胞系U251缺氧的改善作用

目的 观察促红细胞生成素(EPO)对窒息诱导新生大鼠脑损伤和CoCl2诱导人脑胶质瘤细胞系U251缺氧的改善作用.方法 ①7日龄SPF级新生Wistar大鼠随机分为对照组、窒息组、EPO组,每组22只.窒息组和EPO组新生大鼠采用常压窒息法构建脑损伤模型.EPO组脑损伤模型大鼠腹腔注射5000 IU/(kg?d)的EPO,连续注射14 d;窒息组脑损伤模型大鼠注射等体积的生理盐水,连续注射14 d;对照组不注射生理盐水和EPO.每组取10只大鼠,采用Morris水迷宫实验观察各组新生大鼠空间记忆能力,包括逃避潜伏期、上台前游泳路程、90 s内穿越原平台次数、平台内运动距离、平台滞留时间、穿越有效区域次数、有效区域内运动距离和有效区域内滞留时间.采用旷场实验观察各组新生大鼠自主运动能力,包括运动总路程、中央区域路程和平均速度.每组取6只大鼠,连续干预第3天和第7天时断头处死,取大鼠大脑称重并计算脑组织含水量,采用速率法检测血清脑损伤标志物乳酸脱氢酶(LDH).②人脑胶质瘤细胞系U251分为空白对照组、CoCl2组、EPO组,CoCl2组加入CoCl2制备缺氧模型,EPO组加入CoCl2和EPO,空白对照组加入等量培养液,继续培养24 h.采用CCK-8法测算各组细胞存活率,采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率,采用比色法测算各组细胞上清液LDH.结果 ①与对照组比较,窒息组新生大鼠的逃避潜伏期、上台前游泳路程、干预第3天和第7天脑组织含水量及血清LDH水平显著升高(P均<0.05);与窒息组相比,EPO组新生大鼠的逃避潜伏期、上台前游泳路程、干预第3天和第7天脑组织含水量及血清LDH水平显著降低(P均<0.05).与对照组比较,窒息组新生大鼠90 s内穿越原平台次数、平台内运动距离、平台滞留时间、穿越有效区域次数、有效区域内运动距离、有效区域内滞留时间、运动总路程、中央区域路程、平均速度均显著降低(P均<0.05);与窒息组相比,EPO组新生大鼠90 s内穿越原平台次数、平台内运动距离、平台滞留时间、穿越有效区域次数、有效区域内运动距离、有效区域内滞留时间、运动总路程、中央区域路程、平均速度均显著升高(P均<0.05).②EPO组细胞存活率高于CoCl2组(P<0.05),细胞凋亡率、细胞上清液LDH水平均低于CoCl2组(P均<0.05).结论 EPO能够改善窒息后脑损伤大鼠的空间记忆能力、自主运动能力和脑水肿程度,改善脑损伤.EPO能够升高CoCl2诱导的缺氧U251细胞存活率,降低细胞凋亡率和细胞上清液LDH水平.