PI3K/AKT通过激活糖酵解促进巨噬细胞M1极化

目的 探讨PI3K/AKT通路在巨噬细胞糖酵解中的作用,拟从代谢重编程的角度阐明巨噬细胞M1 极化的机制.方法 以脂多糖(LPS)处理RAW264.7 细胞建立巨噬细胞M1 极化模型;使用 2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)抑制糖酵解过程;使用LY294002 抑制PI3K/AKT活性;Seahorse XF糖酵解速率试剂盒检测巨噬细胞糖酵解水平;q-PCR方法检测巨噬细胞M1 型标记(诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子α、白细胞介素 6 和白细胞介素 1β),葡萄糖酵解相关基因(Glut1、HK2、Idha和Aldoa);Western blot方法检测p-p38、p38、p-ERK、ERK、p-p65、p65、IκB、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR、缺氧诱导因子 1α(HIF-1α)和GAPDH水平.结果 在LPS诱导的RAW264.7 细胞M1 极化模型中,p-mTOR和p-AKT水平升高,HIF-1α表达水平升高,糖酵解相关基因水平升高,细胞外酸化率升高,表明LPS诱导细胞糖酵解水平升高;2-DG抑制糖酵解,降低 M1 极化相关因子的 mRNA水平;LY294002 抑制PI3K/AKT活性,降低p-mTOR水平和HIF-1 α的蛋白水平,降低糖酵解相关基因水平,进而抑制RAW264.7 糖酵解水平和M1 极化过程.结论 在RAW264.7 细胞中PI3K/AKT信号通路通过激活mTOR信号通路,激活糖酵解,从而激活巨噬细胞M1 极化过程.