白藜芦醇在人牙髓干细胞成牙本质向分化中的调控机制研究

目的:探讨白藜芦醇是否通过上调沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)的表达并激活β-catenin信号通路,从而促进人牙髓干细胞(DPSCs)成牙本质向分化.方法:不同浓度白藜芦醇(0、10、15、20、50μmol/L)作用于DPSCs7天和14天后,利用CCK-8法检测细胞增殖活性.在15 μmol/L白藜芦醇作用下,成牙本质向分化诱导培养DPSCs7天后,检测碱性磷酸酶(ALP)活性;采用实时定量反转录PCR(qRT-PCR)检测 Runt相关转录因子2(Runx2)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白1(DMP-1)的mRNA表达情况;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测DPSCs分化诱导不同时间(0、3、5、7、14天)后S1RT1的蛋白表达情况.15 μmol/L白藜芦醇作用下分化诱导培养DPSCs 7天后,检测SIRT1和活化β连环蛋白(β-catenin)表达水平.采用GraphPad Prism 9软件包对数据进行统计学分析.结果:15μmol/L白藜芦醇对DPSCs7天和14天的增殖活性无明显影响;15 μmol/L白藜芦醇促进DPSCs的成牙本质向分化,上调Runx2、DSPP和DMP-1的mRNA表达.DPSCs分化诱导7天时,SIRT1蛋白表达量最大;15 μmol/L白藜芦醇作用下分化诱导DPSCs 7天时,SIRT1及活化β-catenin蛋白表达显著增加.结论:白藜芦醇通过上调SIRT1蛋白表达并激活β-catenin信号通路,促进人DPSCs成牙本质向分化.