hUC-MSCs来源外泌体联合肾脑复元汤激活Wnt3a/β-catenin通路减轻NSCs损伤的研究

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源的外泌体联合肾脑复元汤减轻氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经干细胞(NSCs)损伤的作用机制.方法:组织块法分离培养SD乳鼠的NSCs;免疫荧光鉴定NSCs标记物Nestin的表达;流式细胞术鉴定hUC-MSCs,分离外泌体,透射电镜观察;采用OGD/R构建NSCs损伤模型;CCK8法、EdU法和流式细胞术用于评估NSCs的增殖和凋亡;qRT-PCR、蛋白质印迹法和免疫细胞化学法分析Wnt3a/β-catenin通路相关基因的表达.结果:本研究成功分离得到并鉴定了NSCs和hUC-MSCs,以及hUC-MSCs来源的外泌体.OGD/R诱导NSCs细胞活力和增殖率下降,促进细胞凋亡,抑制Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1和TCF4基因和蛋白表达.与OGD/R模型组比较,肾脑复元汤、外泌体,以及二者联用显著增加NSCs的细胞活力和增殖率,抑制凋亡,促进Cyclin D1、β-catenin、Wnt3a和TCF4基因和蛋白的表达.结论:hUC-MSCs来源外泌体联合肾脑复元汤通过促进NSCs细胞增殖减轻OGD/R诱导的NSCs细胞损伤,可能与Wnt3a/β-catenin通路活化有关.