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白鳍鲨SBP1基因的克隆、表达及抗癌活性分析

Chinese Journal of Cell Biology(2022)

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Abstract
硒结合蛋白l(selenium-binding protein 1,SBP1)在多种癌症中起关键作用.目前对SBP1的研究大多集中在模式生物上,对未知基因组物种的SBP1知之甚少.该研究前期基于白鳍鲨体内高硒含量特性及SBP1肽段信号,首次克隆和测序分析了白鳍鲨SBP1的cDNA序列.白鳍鲨SBP1基因的cDNA全长为3 064 bp,开放阅读框为1 419 bp,编码472个氨基酸.白鳍鲨SBP1蛋白序列中组氨酸残基共15个,占比3.2%;其含有2个CxxC、2个HxD和3个HxxH保守区域.通过SWISS-MODEL构建白鳍鲨SBP1三维结构模型,推测定位于β-折叠与连接各结构环交界处的第56位丝氨酸(Ser56)为硒结合位点.系统进化树分析表明,白鳍鲨和象鲨的SBP1同源性最高.在人正常肝细胞HL-7702、人肝癌细胞HepG2和人宫颈癌细胞HeLa中分别转染重组子MYC-SBP1和空载体pcDNA3.1-MYC后,使用Cell Counting Kit-8和CFDA SE细胞增殖示踪荧光探针研究鲨鱼SBP1的抗癌活性.研究发现,无论培养基中是否添加Na2SeO3,在HeLa和HepG2癌细胞中表达重组蛋白SBP1都会显著抑制细胞增殖.相反,表达SBP1组将促进正常HL-7702细胞增殖.该研究推测硒的化学预防作用与SBP1的功能高度相关.在某种程度上,可能是SBP1蛋白(而不是硒)在预防癌症中起着更关键的作用.
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