MiR-103a通过TAK1介导的NF-κB信号通路保护炎症诱导的心肌细胞损伤的研究

目的 研究miR-103a表达对炎症诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制与转化生长因子β活化激酶1(TAK1)及其介导的NF-κB信号通路的关系.方法 通过肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理H9C2细胞建立炎症诱导的H9C2心肌细胞凋亡体外模型.将不同处理的H9C2细胞分为对照组、TNF-α组、TNF-α+miR-nc组、TNF-α+miR-103a组、TNF-α+si-nc组、TNF-α+si-TAK1组、miR-nc+AAV-nc组和miR-103a+AAV-TAK1组.对照组不进行任何处理,其他各组(除TNF-α组外)细胞均进行转染,并经20μg/mL TNF-α处理24 h,使用流式细胞仪检测细胞凋亡和CCK-8试剂盒检测细胞活性.通过caspase 3、8和9试剂盒测定凋亡相关蛋白caspase 3、8和9蛋白表达.qRT-PCR检测miR-103a表达,免疫印迹检测TAK1、NF-κB和p-NF-κB蛋白表达.结果 与对照组比较,TNF-α组H9C2细胞中miR-103a表达显著降低,TAK1蛋白表达显著升高.过表达miR-103a或敲低TAK1均可显著下调TNF-α诱导的H9C2细胞凋亡(P<0.05),并显著下调caspase 3、8和9蛋白表达(P<0.05).双荧光素酶基因报告系统检测结果显示:miR-103a靶向抑制H9C2细胞中TAK1表达.过表达miR-103a或下调TAK1均显著降低NF-κB的磷酸化(P<0.05),而过表达TAK1显著降低miR-103a过表达对TNF-α诱导的H9C2细胞凋亡的抑制作用和对NF-κB的磷酸化的抑制作用.结论 TNF-α处理H9C2心肌细胞下调miR-103a和上调TAK1蛋白表达,miR-103a可通过靶向抑制TAK1而抑制NF-κB信号通路的激活,最终抑制TNF-α诱导的H9C2心肌细胞凋亡.