PAS-Na对锰致大鼠基底核原代星形胶质细胞损伤的拮抗模型探讨

目的 探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对锰(Mn)致大鼠基底核原代星形胶质细胞损伤的拮抗作用,为深入Mn中毒机制及其防治研究提供科学技术平台.方法 取SPF级新生24 h内SD大鼠基底核进行消化、传代培养,用荧光免疫法鉴定星形胶质细胞.给予不同浓度Mn(125、250、500和1 000 μmol/L)和PAS-Na(5、50、500和5 000 μmol/L)对星形胶质细胞处理24 h,用MTT法测定细胞存活率,按细胞存活率75％为Mn细胞毒性的筛选标准,细胞存活率100％为PAS-Na无细胞毒性标准,选择染Mn和PAS-Na干预剂量.结果 染不同浓度Mn 24 h后,星形胶质细胞出现不同程度的肿胀或皱缩,并随染锰浓度增加而加重.正常培养液(对照)、125、250、500和1 000μmol/L Mn组细胞存活率依序为100.0％、91.5％、83.3％、78.2％和55.6％.与对照组比较,250、500和1 000 μmol/L Mn组细胞存活率均降低(P＜0.05).随着Mn浓度增高,细胞存活率呈剂量-反应性下降(r=0.979).给予5、50、500和5 000μmol/L PAS-Na处理24 h后,细胞形态和存活率无明显改变.故选择500 μmol/L Mn作为染Mn剂量,50、150和450μmol/L PAS作为干预剂量.与500 μmol/L染Mn组比较,150和450 μmol/L PAS-Na干预后,细胞皱缩程度减轻,细胞突起增多.150和450 μmol/L PAS-Na干预组细胞存活率(89.7％、93.2％)比染Mn组(75.6％)高(P＜0.05).结论 染500 μmol/L Mn24h后,星形胶质细胞出现明显的毒性,PAS-Na对染Mn细胞毒性有明显的干预作用,提示PAS-Na对染Mn大鼠原代星形胶质细胞损伤的拮抗作用模型构建成功.