鸡毒支原体PstS蛋白的原核表达及其定位

SONG Chun,YANG Mei,YUE Jun,SHAN Chunlan,WANG Kaigong,CHENG Zhentao

Journal of Fujian Agriculture and Forestry University(Natural Science Edition)（2023）

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摘要

通过SOE-PCR技术获得PstS基因全长并克隆到pColdⅠ,将重组表达载体pCold-PstS转化进BL21(DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白PstS,将其纯化后免疫新西兰兔制备多克隆兔抗血清,提取鸡毒支原体总蛋白、膜蛋白和胞浆蛋白,通过Western blot分析PstS蛋白的亚细胞定位.结果表明,PstS基因长度为1065 bp,其蛋白在氨基酸9～31之间存在跨膜区,pCold-PstS经诱导表达获得融合蛋白PstS(存在于细胞膜和胞浆中),其约43 ku并具有较好的抗原性.PstS蛋白是鸡毒支原体膜表面的免疫原性蛋白,可为进一步研究其生物学功能和基因工程疫苗提供依据.

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关键词

Mycoplasma gallisepticum,PstS gene,prokaryotic expression,subcellular localization

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