烟酸通过降低氧化应激水平提高绵羊精子低温保存效果

低温保存可有效延长精子体外保存时间,提高精液利用效率.但是长时间处于低温环境下会造成活性氧(reactive oxygen species,ROS)持续累积,诱发精子氧化应激,降低质膜完整性,造成精子活力下降.旨在研究绵羊精子4℃保存条件下,稀释液添加不同浓度烟酸(nicotinic acid,NA)对精子的保存效果,并探讨其作用机理.采集健康的成年德国美利奴种公羊精液(n=6),以基础稀释液中添加5、10、20 mmol·L-1 NA为保护剂,拟阐明NA对绵羊精子的保护作用.通过精子分析仪检测精子活力、运动性能,精子低渗膨胀试验检测质膜完整性,荧光染色检测精子中ROS水平、线粒体功能,试剂盒检测H2O2含量、抗氧化因子活性水平及ATP水平.结果表明:与10％BSA对照组相比较,添加NA处理后精子的存活时间可延长至120 h,其中10 mmol·L-1 NA NA处理后第72小时精子活力仍可达到70％以上;在NA处理后24～72 h时,绵羊精子可保持更高的活力、运动性能与及质膜完整性(P＜0.05),而且降低了精子中的ROS水平(P＜0.05).在NA处理后第72小时,精子中H2O2含量显著低于10％BSA对照组(P＜0.05),而精子中抗氧化因子(CAT、GSH-PX、T-SOD、T-AOC)活性水平、线粒体功能以及ATP水平均显著优于10％BSA对照组(P＜0.05).综上,在4℃保存条件下,绵羊精液低温稀释液中添加NA,可提高精子的活力、运动性能、质膜完整性和抗氧化能力,并改善精子线粒体功能和ATP生成,有效提升绵羊精子低温保存效果.