莪术醇对肝星状细胞内质网应激和凋亡的作用研究

目的 探究莪术醇对肝星状细胞内质网应激和凋亡的作用,阐明其抗肝纤维化作用的机制.方法 将肝星状细胞分为对照组(正常培养)、模型组(1μg·mL-1脂多糖)和低、中、高剂量实验组(在模型组基础上分别使用12.5、25.0和50.0 mg·L-1莪术醇处理)组.用噻唑蓝法检测莪术醇对肝星状细胞活力的影响;用流式细胞术检测各组细胞凋亡发生情况和各组活性氧(ROS)的表达;用蛋白质印迹法检测各组B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、内质网应激相关蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶RNA样内质网激酶p-PERK)、半胱氨酸蛋白酶12(caspase12)蛋白表达情况;用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ型(collagen Ⅰ)、胶原蛋白Ⅲ型(collagen Ⅲ)mRNA表达情况.结果 对照组、模型组、高剂量实验组细胞ROS表达水平分别为(21.09±4.51)％、(32.78±2.90)％和(72.81±6.89)％;GRP78 蛋白相对表达水平分别为0.19±0.02、0.24±0.03 和 0.51±0.04;α-SM4 mRNA 表达水平分别为1.04±0.08、4.44±0.08和2.73±0.15.上述指标,模型组与空白对照组比较,高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 莪术醇通过ROS介导肝星状细胞内质网应激导致肝星状细胞凋亡,从而抑制肝星状细胞活化减少细胞外基质的沉积.