羟基红花黄色素A对糖氧剥夺/复糖复氧诱导的BV2细胞炎性反应的机制研究

目的 探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对糖氧剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的小胶质细胞(MG)炎性反应作用机制的研究.方法 构建BV2细胞OGD/R模型模拟脑缺血再灌注损伤,BV2细胞分为正常对照组(常规培养)、模型组(OGD/R 模型)、HSYA 药物干预组(OGD/R 模型+25 μmol·L1 HSYA)、TREM2 激动剂组(5 μmol·L-1Hsp60+OGD/R 模型)、HSYA+TREM2 激动剂组(5 μmol.L-1 Hsp60+OGD/R 模型+25 μmol·L-1 HSYA).用蛋白质印迹法(Western blot)检测髓样细胞触发受体2(TREM2)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达情况,用双重免疫荧光染色检测一氧化氮合酶(iN-OS)和精氨酸酶1(Arg1)荧光染色数量;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-10的表达.结果 正常对照组、模型组、HSYA药物干预组、TREM2激动剂组、HSYA+TREM2 激动剂组 IL-1β 的含量分别为(48.10±2.42)、(76.16±5.03)、(55.88±3.35)、(91.15±3.43)和(69.47±7.04)pg·mL-1;TNF-α 的含量分别 为(307.42±37.63)、(479.63±34.13)、(377.87±36.16)、(671.55±33.47)和(496.85±47.68)pg·mL-1;TREM2 蛋 白表达分别为 0.72±0.02、1.20±0.04、0.85±0.03、1.97±0.14 和 1.06±0.27;TLR4 蛋白表达分别为0.32±0.01、0.43±0.02、0.37±0.03、0.62±0.02 和 0.39±0.04;iNOS 蛋白免疫荧光染色数量分别为 1.83±0.25、28.80±4.73、12.73±2.63、60.11±4.77和32.17±4.31;Arg1蛋白免疫荧光染色数量分别为1.91±0.19、21.90±2.62、66.70±3.96、12.43±2.11和20.50±4.49.上述指标,模型组与正常对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05);HSYA药物干预组、TREM2激动剂组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05);HSYA+TREM2激动剂组与TREM2激动剂组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 HSYA可调控TREM2的表达,进而抑制TLR4/NF-κB通路的激活以减轻神经炎性反应.