达格列净改善高糖诱导的人脐静脉内皮细胞功能的机制研究

目的:探讨达格列净对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖、迁移、成管和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:将HUVECs分别采用5.5 mmol/L （对照）、25 mmol/L葡萄糖（高糖）、达格列净和高糖+达格列净干预细胞，用脂质体转染法将pcDNA、pcDNA-JAK2转入HUVECs，后用达格列净和（或）高糖处理。采用CCK8法检测细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移能力，血管形成实验检测细胞成管能力，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达情况。采用析因设计方差分析或单因素方差分析进行组间比较。结果:与对照比较，高糖干预细胞活力（0.37±0.05比0.69±0.07）、迁移数、管型形成数均降低，细胞凋亡率[（20.06±5.87）%比（1.95±0.56）%]、p-JAK2 （2.16±0.18比1.06±0.12）和p-STAT3均升高（P均< 0.05），达格列净干预可逆转高糖引起的上述变化。与pcDNA比较，pcDNA-JAK2的细胞活力（0.31±0.03比0.69± 0.10）、迁移数和管型形成数均降低，凋亡率[（20.59±2.81）%比（1.63±0.16）%]、p-JAK2（2.15±0.10比1.03±0.07）和p-STAT3蛋白表达均升高（P均< 0.05），过表达JAK2后高糖干预细胞活力、迁移数和管型形成数进一步降低，凋亡率、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达进一步升高。与pcDNA-JAK2比较，pcDNA-JAK2+达格列净处理的细胞活力（0.65±0.06比0.31±0.03）、迁移数和管型形成数均升高，细胞凋亡率[（9.68±0.83）%比（20.59±2.81）%]、p-JAK2 （1.32±0.04比2.15±0.10）和p-STAT3蛋白的表达均降低（P均< 0.05）。与pcDNA-JAK2+高糖处理比较，pcDNA-JAK2+高糖+达格列净处理的HUVECs活力、体外迁移数量和管型形成数量升高，凋亡率、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平均降低（P均< 0.05）。结论:达格列净促进高糖诱导的HUVECs增殖、迁移和成管能力的恢复，抑制细胞凋亡，其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。