达格列净改善高糖诱导的人脐静脉内皮细胞功能的机制研究

Chinese Journal of Cell and Stem Cell (Electronic Edition)(2023)

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Abstract
目的:探讨达格列净对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移、成管和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:将HUVECs分别采用5.5 mmol/L (对照)、25 mmol/L葡萄糖(高糖)、达格列净和高糖+达格列净干预细胞,用脂质体转染法将pcDNA、pcDNA-JAK2转入HUVECs,后用达格列净和(或)高糖处理。采用CCK8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移能力,血管形成实验检测细胞成管能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达情况。采用析因设计方差分析或单因素方差分析进行组间比较。结果:与对照比较,高糖干预细胞活力(0.37±0.05比0.69±0.07)、迁移数、管型形成数均降低,细胞凋亡率[(20.06±5.87)%比(1.95±0.56)%]、p-JAK2 (2.16±0.18比1.06±0.12)和p-STAT3均升高(P均< 0.05),达格列净干预可逆转高糖引起的上述变化。与pcDNA比较,pcDNA-JAK2的细胞活力(0.31±0.03比0.69± 0.10)、迁移数和管型形成数均降低,凋亡率[(20.59±2.81)%比(1.63±0.16)%]、p-JAK2(2.15±0.10比1.03±0.07)和p-STAT3蛋白表达均升高(P均< 0.05),过表达JAK2后高糖干预细胞活力、迁移数和管型形成数进一步降低,凋亡率、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达进一步升高。与pcDNA-JAK2比较,pcDNA-JAK2+达格列净处理的细胞活力(0.65±0.06比0.31±0.03)、迁移数和管型形成数均升高,细胞凋亡率[(9.68±0.83)%比(20.59±2.81)%]、p-JAK2 (1.32±0.04比2.15±0.10)和p-STAT3蛋白的表达均降低(P均< 0.05)。与pcDNA-JAK2+高糖处理比较,pcDNA-JAK2+高糖+达格列净处理的HUVECs活力、体外迁移数量和管型形成数量升高,凋亡率、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平均降低(P均< 0.05)。结论:达格列净促进高糖诱导的HUVECs增殖、迁移和成管能力的恢复,抑制细胞凋亡,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。
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