京尼平交联人胎儿血红蛋白的实验研究

目的 采用京尼平(Genipin,Gnp)对人胎儿血红蛋白(hemoglobin isolated from fetal,HbF)交联反应,预期目标为有效聚合率≥70％(分子量在64～600 KD)和平均分子量100～300 KD.方法 以HbF为原料,Gnp为交联剂.选择血红蛋白浓度(HbC)、Gnp与HbF的摩尔比、反应时间和反应pH进行四因素三水平正交试验(n=3),确定较佳匹配条件.制备三批次京尼平交联人胎儿血红蛋白(Gnp-HbF)样品,检查有效聚合率、二聚体、平均分子量、高铁血红蛋白(MetHb)含量及P50.结果 正交试验得出Gnp-HbF较佳匹配条件:HbC为80g/L、Gnp与HbF摩尔比为7∶1、反应时间18h和反应pH为8.5.本条件下Gnp-HbF样品有效聚合率为(73.03±2.03)％,二聚体为(26.97±2.03)％,平均分子量为(167.70±28.40)KD,高铁血红蛋白占比(2.60±0.17)％,P50为(13.13±1.02)mmHg.结论Gnp能很好地交联HbF,所得到的Gnp-HbF制品各项关键指标符合要求,为后续工艺降低了制备难度.