松油烯-4-醇通过调控KLF4/NF-κB信号通路抑制高糖诱导的VSMCs增殖作用研究

研究松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖(HG)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的抑制作用,以及对Krüppel样因子4(Krüpple-like factor 4,KLF4)表达和NF-κB信号通路的影响.预先给予T4O预孵育2 h后,加入HG共孵育48 h诱导VSMCs损伤模型.MTT法检测VSMCs增殖;流式细胞仪检测细胞周期;划痕实验检测细胞迁移率;ELISA法检测VSMCs上清液中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot检测增殖细胞核抗原PCNA、周期相关蛋白Cyclin D1,以及KLF4和炎症相关蛋白NF-κB p-p65、IL-1β和IL-18的表达水平.siRNA-KLF4转染实现KLF4在VSMCs的沉默表达,观察T4O对HG诱导VSMCs细胞周期及上述蛋白表达水平的影响.结果显示,与HG组比较,不同剂量的T4O干预给药可明显抑制HG诱导的VSMCs增殖,增加G1期细胞百分比、降低S期细胞百分比,抑制细胞迁移能力,下调HG诱导的PCNA和Cyc-lin D1蛋白表达水平;同时,下调KLF4蛋白表达和NF-κB p-p65/NF-κB p65、IL-1β和IL-18的表达水平,降低炎症因子IL-6和TNF-α的分泌与释放;沉默KLF4可实现KLF4的低表达,与si-NC+HG组比较,siKLF4+HG组可降低S期细胞百分比,增加G1期细胞百分比,下调PCNA、Cyclin D1、KLF4蛋白表达水平及抑制NF-κB信号通路的激活,沉默KLF4与T4O共处理后可进一步促进上述指标的变化.上述结果表明,T4O对HG诱导的VSMCs增殖具有抑制作用,其作用可能与下调KLF4的水平,抑制NF-κB信号的激活有关.