阿克替苷通过调控JNK信号通路促进肝癌细胞自噬与凋亡的实验研究

探讨阿克替苷(acteoside)通过JNK信号通路抑制H22荷瘤小鼠瘤体的分子机制.50只BALB/c雄性小鼠经H22肝癌细胞皮下造模后,分为模型组、顺铂组以及阿克替苷低、中、高剂量组5组,每组均给药2周,每周连续给药5d.观察各组小鼠精神、饮食、饮水、活动度、皮毛等一般状况.比较给药前后小鼠体质量变化及各组小鼠瘤体体积、瘤重和抑瘤率.HE染色观察肝癌组织形态学变化,免疫组化和Western blot检测各肿瘤组织中p-JNK、JNK、Bcl-2、Beclin-1和LC3的表达,qRT-PCR检测JNK、Bcl-2、Beclin-1和LC3 mRNA的表达.模型组和阿克替苷低剂量组小鼠一般状况较差,其余3组小鼠的一般状况均改善.阿克替苷中、高剂量组和顺铂组小鼠体质量小于模型组(P<0.01).模型组瘤体体积与阿克替苷低剂量组比差异无统计学意义,顺铂组瘤体体积与阿克替苷高剂量组比差异无统计学意义.阿克替苷中、高剂量组和顺铂组瘤体体积和瘤重与模型组相比显著减小(P<0.001).阿克替苷低、中、高剂量组和顺铂组的抑瘤率分别为10.72％、40.32％、53.79％、56.44％.HE染色显示,阿克替苷组和顺铂组肝癌细胞数逐渐减少,细胞坏死征象不断增多,阿克替苷高剂量组和顺铂组坏死区域较多.免疫组化结果显示,阿克替苷组和顺铂组可上调Beclin-1、LC3、p-JNK、JNK的表达(P<0.05).免疫组化、Western blot和qRT-PCR结果显示,阿克替苷中、高剂量组和顺铂组可下调Bcl-2的表达(P<0.01).Western blot结果显示,阿克替苷组和顺铂组可上调Beclin-1、LC3和p-JNK的表达(P<0.01),各组JNK的表达水平差异无统计学意义.qRT-PCR结果显示,阿克替苷组和顺铂组可上调Beclin-1、LC3 mRNA的水平(P<0.05),阿克替苷中、高剂量组和顺铂组可上调JNK mRNA的水平(P<0.001).综上,阿克替苷可上调JNK信号通路促进H22荷瘤小鼠肝癌细胞的凋亡和自噬进而发挥抑制瘤体生长的作用.