胶体金免疫层析法在产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌检测中的应用评价

目的 评估胶体金免疫层析法在产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌(CPE)中的应用价值.方法 收集福建医科大学附属第一医院分离的65株肠杆菌目细菌,包括41株碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)和24株非CRE菌株.采用PCR法检测5种碳青霉烯类耐药基因(blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48-like、blaNDM),改良碳青霉烯类失活法(mCIM)与EDTA碳青霉烯类失活法(eCIM)以及胶体金免疫层析法检测碳青霉烯酶并分型,以PCR结果为参考,评估各方法的检测性能;挑取其中29株CRE与24株非CRE构建模拟阳性血培养瓶,报阳后以胶体金免疫层析法进行分型检测并评估其性能.结果 PCR结果发现25株菌携带blaKPC基因、7株携带blaNDM基因、4株携带blaIMP基因、4株同时携带blaKPC+NDM基因、1株同时携带blaKPC+NDM+IMP基因,另外24株未检出相应耐药基因.41株CRE的mCIM试验结果均为阳性,其中11株eCIM试验结果阳性.24株非CRE菌株的mCIM试验结果均为阴性.mCIM试验与eCIM联合试验检测丝氨酸酶的敏感性与特异性均为100.00％,Kappa值为1.000;检测金属酶的敏感性为68.75％、特异性为100.00％,Kappa值为0.725.胶体金免疫层析法均能准确检出临床分离株与血培养阳性标本中的碳青霉烯酶,与PCR法的分型结果一致,因此其敏感性与特异性均为100.00％,Kappa值为1.000.结论 胶体金免疫层析法操作简便、用时较短,具有较高的敏感性与特异性,同时可大大缩短CPE血流感染的诊断时间,适合临床的推广应用.