β羟基丁酸通过抑制细胞凋亡减轻顺铂所致肾损伤

目的:探究β羟基丁酸（β-hydroxybutyrate，β-HOB）对顺铂（cisplatin，CP）所致肾损伤的保护作用及其机制。方法:10周龄雄性C57BL/6J小鼠被随机分为对照组、CP组和β-HOB+CP组：对照组不做任何处理；CP组和β-HOB+CP组于实验第8天一次性腹腔注射20 mg/kg顺铂制备肾损伤模型；β-HOB+CP组小鼠自实验第1天接受连续10 d的20 mmol/kg β-HOB腹腔注射，CP组连续10 d注射同体积生理盐水；第10天结束实验。HE染色评价肾组织损伤情况；取小鼠外周血测定血清尿素氮、肌酐水平；免疫组化法检测小鼠肾组织丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）、核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）及凋亡指标胱天蛋白酶（Caspase3）、剪切型（Cleaved）-caspase3的蛋白表达；Western印迹法检测磷酸化（p）-MAPK/MAPK和p-NF-κB/NF-κB的蛋白相对表达量。体外细胞（HK-2细胞）实验分组：对照组、CP组、β-HOB+CP组及β-HOB+CP+Sappanone A（MAPK-p38激活剂）组。细胞免疫荧光法检测细胞p-MAPK、p-NF-κB、Caspase3和Cleaved-caspase3蛋白表达；流式细胞术检测细胞线粒体膜电位和细胞凋亡；TUNEL染色法检测细胞DNA损伤情况。结果:体内实验结果显示，CP组小鼠肾组织病理损伤评分、血清尿素氮和血清肌酐水平均显著高于对照组（均 P<0.05）；β-HOB+CP组肾组织病理损伤评分、血清尿素氮和血清肌酐水平均显著低于CP组（均 P<0.05）。CP组小鼠肾组织p-MAPK、p-NF-κB、Caspase3及Cleaved-caspase3蛋白表达均显著高于对照组，β-HOB+CP组上述蛋白表达均显著低于CP组（均 P<0.05）。体外实验结果显示，β-HOB+CP组细胞线粒体膜电位显著高于CP组，Caspase3、Cleaved-caspase3、p-MAPK和p-NF-κB蛋白表达、凋亡细胞比例及TUNEL染色阳性细胞数量均显著低于CP组（均 P<0.05）；β-HOB+CP+Sappanone A组细胞线粒体膜电位显著低于β-HOB+CP组，Caspase3和Cleaved-caspase3蛋白表达量、凋亡细胞比例及TUNEL染色阳性细胞数量均显著高于β-HOB+CP组（均 P<0.05）。 结论:β-HOB可减轻顺铂所致的肾损伤，其机制可能与抑制MAPK/NF-κB通路及减少细胞凋亡有关。