七氟烷对甲状腺癌细胞AMPK-SIRT1-PGC-1α信号通路的调控作用研究

目的 探究七氟烷对甲状腺癌细胞能量代谢信号通路AMPK-SIRT1-PGC-1α的调控作用.方法 将人甲状腺癌细胞株(TPC-1)分为对照组、NC组、七氟烷组和七氟烷+AICAR组,MTT检测各组TPC-1细胞在24、48、72 h细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞存活、早期凋亡及晚期凋亡水平,qPCR检测细胞AMP依赖蛋白激酶(adenosine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK)、AMPK/AD-依赖性去乙酰化酶Sirtuin-1(NAD-dependent deacetylase sirtuin-1,SIRT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator,PGC-1α)mRNA表达水平,Western blot检测细胞AMPK、SIRT1和PGC-1α蛋白表达水平.结果 与对照组相比,七氟烷组细胞在24、48、72 h细胞增殖水平显著下降,分别为70.42±1.51、62.16±1.73、55.21±1.22,且有时间依赖效应,差异有统计学意义(P<0.01);七氟烷组细胞存活比例显著降低,早期凋亡和晚期凋亡比例显著增加,分别为(62.71±2.73)％、(16.21±0.22)%、(22.49±2.32)%,差异有统计学意义(P<0.01);qPCR和Western blot实验表明七氟烷组AMPK、SIRT1、PGC-1α mRNA和蛋白表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);NC组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).与七氟烷组相比,七氟烷+AICAR组细胞在24、48、72 h细胞增殖显著升高,分别为86.11±1.33、78.28±1.41、62.24±1.24,差异有统计学意义(P<0.01);七氟烷+AICAR组细胞存活比例显著升高,早期凋亡和晚期凋亡比例显著降低,分别为(72.25±2.33)%、(12.21±1.01)%、(14.21±2.01)%,差异有统计学意义(P<0.01);qPCR和Western blot实验表明七氟烷+AICAR组AMPK、SIRT1、PGC-1α mRNA和蛋白表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 七氟烷可以抑制甲状腺癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡,此过程与抑制能量信号通路AMPK-SIRT1-PGC-1α的激活有关.