猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白7多克隆抗体的制备及鉴定
Progress in Veterinary Medicine（2023）
摘要
制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)非结构蛋白 7(nsp7)的多克隆抗体.根据 NCBI 上公布的PRRSV nsp7 序列,合成基因后克隆至原核表达载体 pET28a,对重组菌进行诱导,获得表达并纯化PRRSV nsp7 重组蛋白.采用皮下多点注射的方式对新西兰白兔进行免疫接种制备兔多克隆血清,分别使用ELISA、IFA、Western blot等方法验证该多克隆血清与PRRSV以及nsp7 重组蛋白的免疫反应性.间接ELISA检测结果显示,制备的多抗血清可以特异性识别原核表达的nsp7,IFA检测结果证实制备的 nsp7 多抗能特异性结合 PRRSV,Western blot 结果证实多抗血清能特异性结合 PRRSV 以及纯化的重组蛋白nsp7.以上结果表明,成功制备了PRRSV nsp7 的多克隆抗体.
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