Rab27A蛋白调控转录因子E盒结合锌指蛋白1对白细胞介素-6/信号转导与转录激活因子3信号通路的影响

目的:探索三阴性乳腺癌中Rab27A蛋白调控转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)对白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法:通过生信分析Rab27A与ZEB1在三阴性乳腺癌中表达，在体外培养三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MDA-MB-468)使用慢病毒转染技术进行Rab27A、ZEB1过表达及敲减，并通过回复实验构建Rab27A过表达ZEB1敲减、Rab27A敲减ZEB1过表达的三阴性乳腺癌细胞系。运用蛋白质印迹法(Western blot)验证其蛋白表达。通过免疫印迹技术研究Rab27A调控ZEB1对IL-6/STAT3信号通路的影响，Shapiro-Wilk检测实验数据均服从正态分布。结果:在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中，蛋白质印迹法(Western blot)结果显示，ZEB1过表达组高于阴性对照组，差异有统计学意义(0.607±0.019比0.460±0.073， F＝124.111， P<0.05)，Rab27A敲减组低于阴性对照组，差异有统计学意义(0.118±0.003比0.460±0.073， F＝124.111， P<0.05)，ZEB1敲减组低于阴性对照组且有统计学意义(0.156±0.048比0.460±0.073， F＝124.111， P<0.05)。在三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞系中，蛋白质印迹法(Western blot)结果显示Rab27A过表达组高于阴性对照组，差异有统计学意义(0.735±0.007比0.667±0.006， F＝1 859.845， P<0.05)，ZEB1过表达组高于阴性对照组，差异有统计学意义(0.905±0.014比0.667±0.006， F＝1 859.845， P<0.05)，Rab27A敲减组低于阴性对照组，差异有统计学意义(0.310±0.002比0.667±0.006， F＝1859.845， P<0.05)，ZEB1敲减组低于阴性对照组，差异有统计学意义(0.278±0.003比0.667±0.006， F＝1 859.845， P<0.05)。Rab27A过表达时ZEB1表达量高于ZEB1阴性对照组表达量，差异有统计学意义(0.735±0.007比0.905±0.014， F＝1 859.845， P<0.05)，Rab27A敲减时ZEB1表达量低于ZEB1阴性对照组，差异有统计学意义(0.310±0.002比0.278±0.003， F＝1 859.845， P<0.05)。在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中，Rab27A过表达时IL-6/STAT3信号通路被显著激活(2.010±0.092比1.440±0.089， F＝196.692， P<0.05)，三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞系中，结果与MDA-MB-231相同(1.963±0.007比1.282±0.011， F＝2 211.290， P<0.05)。在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中。在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中，Rab27A能回复ZEB1过表达时对IL-6/STAT3信号通路有激活趋势，差异有统计学意义(1.808±0.053比1.440±0.089， F＝196.692， P<0.05)，在三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞系中，Rab27A能回复ZEB1过表达时对IL-6/STAT3信号通路有激活趋势，差异有统计学意义(1.545±0.007比1.282±0.011， F＝2 211.290， P<0.05)。 结论:在三阴性乳腺癌中Rab27A通过正向调控ZEB1的表达可激活IL-6/STAT3信号通路。