一种改良的人脐带间充质干细胞培养方法

目的:建立一种改良的人脐带间充质干细胞(MSCs)的培养方法，并分析其生物学特性。方法:采用组织块贴壁法原代分离人脐带MSCs，首先在杜尔伯科改良伊格尔(DMEM)高糖培养基培养，接着改用含有间充质干细胞生长添加物的DMEM培养基传代培养；传代两次后，重新换回DMEM培养基进行培养(三联法培养组)。同时以DMEM高糖培养基作为对照组。通过绘制生长曲线，细胞表面标志物检测，成脂分化检测等，对培养获得的人脐带MSCs进行鉴定。两组间比较采用 t检验。 结果:三联法培养组获得人脐带MSCs成功率高，组织块加放无菌盖玻片的细胞爬出时间、原代培养时间和细胞密度明显优于未加无菌盖玻片[(96.16±4.61) h比(139.50±6.26) h，(15.17±2.36) d比(21.47±2.83) d，30.57%比14.27%， t＝9.650、2.960、9.669， P<0.05]，差异均有统计学意义；人脐带MSCs细胞表面高表达CD44(99.05%)和CD29(98.51%)，不表达造血干细胞表型CD45(0.05%)，且具有多向分化潜能。 结论:本方法分离培养的人脐带MSCs，步骤简单、成功率高、成本较低，适用于人脐带MSCs的大规模培养。