Ct-OATP1B3对人非小细胞肺癌细胞增殖、周期、凋亡、侵袭的影响及其机制

本研究旨在通过构建过表达及敲低Ct-OATP1B3基因的质粒,探讨Ct-OATP1B3对人(Homo sapiens)非小细胞肺癌细胞株H1975和PC9增殖、周期、凋亡、侵袭的影响及其机制.用RT-qPCR法检测各组细胞中 Ct-OATP1B3、E-cadherin、N-cadherin 和 Vimentin mRNA 的表达量,Western blot 法检测各细胞中Ct-OATP1B3、GAPDH、Tubulin、Na+/K+ATPase、E-cadherin、N-cadherin 和 Vimentin 的蛋 白含量.采用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,流式细胞仪检测各组细胞的周期和凋亡变化,Transwell小室法检测各组细胞的侵袭能力.结果显示,Ct-OATP1B3在非小细胞肺癌细胞株H1975和PC9中的mRNA和蛋白含量明显高于正常肺上皮细胞BEAS-2B的,且在PC9细胞中的表达水平相对最高.H1975细胞用Ct-OATP1B3过表达质粒转染后,与空载组相比,过表达组中Ct-OATP1B3的mRNA和蛋白水平明显升高(P＜0.01),细胞增殖活力增加(P＜0.01),侵袭能力增加(P＜0.01),周期和凋亡无明显变化,E-cadherin的mRNA和蛋白水平下调(P＜0.01),N-cadherin和Vimentin的mRNA和蛋白水平上调(P＜0.05,P＜0.01).PC9细胞用Ct-OATP1B3敲低质粒转染后,与阴性对照组相比,敲低组中Ct-OATP1B3的mRNA和蛋白水平明显下降(P＜0.01),细胞增殖活力降低(P＜0.05),侵袭能力减弱(P＜0.01),周期与凋亡无明显变化,E-cadherin mRNA和蛋白水平上调(P＜0.01),N-cadherin和Vimentin的mRNA和蛋白水平下调(P＜0.01).本研究提示,Ct-OATP1B3对人非小细胞肺癌细胞株H1975和PC9的增殖和侵袭有明显影响,对周期和凋亡无明显影响,其机制可能与调节上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)进程有关.