微生物靶向光动力疗法联合28kHz超声对MRSA生物被膜内细菌的杀伤作用

目的 观察阳离子亚苄基环戊酮类光敏剂(P3)介导的微生物靶向光动力疗法(antimicrobial photodynamic therapy,aPDT)联合28 kHz超声对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)生物被膜的杀伤作用,以及该联合方法作用对正常真核细胞的影响.方法 (1)生物被膜内细菌杀伤实验:采用MRSA临床菌株.实验分为对照组和实验组两个大组.对照组再分别为空白对照组(C组)、单纯照光组(L组)、单纯光敏剂组(PS组)、单纯超声组(US组)四个亚组.实验组再分为超声加光敏剂(US+PS组)、光动力组(aPDT组)、光动力联合超声组(aPDT+US组)三个亚组.各组4个复孔,实验重复3次.激光照射波长532 nm、功率密度40 mW/cm2、时间10 min;超声辐照剂量为频率28 kHz、功率密度500 mW/cm2、时间10 min.各组处理后采用XTT法检测OD值,以评估各组生物被膜内细菌活力.(2)细胞杀伤实验:实验采用人皮肤成纤维细胞WS-1,分组和处理方法同细菌杀伤实验,各组处理后继续培养24 h,采用CCK-8法检测OD值,以评估各组细胞活力情况.结果 (1)光动力组和超声联合光动力组生物被膜内细菌活力分别为55.9％和15.1％,两组比较差异具有统计学意义(P＜0.05),且超声联合光动力组的细菌活力抑制率(84.9％)高于单纯超声组与光动力组之和(6.7％+44.1％=50.8％),说明两种方法联合具有协同效应.(2)联合处理后,WS-1细胞活力仅出现轻度降低,保持在86.2％.结论 微生物靶向光动力联合28kHz低强度超声对MRSA生物被膜具有协同杀菌效应,并且该联合方法不会对正常真核细胞造成严重损伤.