Effect of Wendan Decoction(温胆汤)-Containing Serum on PSD-95,GAP-43,JIP-3,Cx-43 in 10 mmol/L Glutamate-Induced Astrocytes

目的:以谷氨酸作用的星形胶质细胞为细胞模型,通过检测突触可塑性相关蛋白的变化,并从突触可塑性角度探讨温胆汤改善精神分裂症认知障碍的分子机制.方法:将大鼠随机分成5组:正常对照组、氯氮平0.02 g/kg组和温胆汤20、30、40 g/kg组.正常对照组灌胃生理盐水,其余各组灌胃相应药物,1次/d,7 d后取血,制备含药血清.采用MTT法确定谷氨酸对星形胶质细胞的作用浓度和时间点;观察温胆汤含药血清对谷氨酸造模的星形胶质细胞形态变化的影响;RT-qPCR法检测星形胶质细胞中突触后致密蛋白95(Psd95)、生长相关蛋白43(Gap43)、Jnk相互作用蛋白3(JIP3)、连接蛋白43(Cx43)mRNA表达;WB法检测星形胶质细胞中PSD-95、GAP-43、JIP-3、Cx-43蛋白表达.结果:根据不同浓度谷氨酸对星形胶质细胞增殖率影响的结果,确定谷氨酸浓度为10 mmol/L的条件下作用星形胶质细胞48 h为细胞实验条件.与正常对照组比较,模型对照组星形胶质细胞形态皱缩、拉长、呈多边形,突触少而且短,形态简单,细胞密度低;其Psd95、Gap43、Jip3、Cx43 mRNA和蛋白表达显著下调(P＜0.01);与模型对照组比较,温胆汤20、30、40g/kg含药血清组星形胶质细胞、突触的形态和状态均有比较大的改善,且细胞密度更密集,并明显上调Psd95、Gap43、Jip3、Cx43 mRNA和蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.01).结论:温胆汤能有效改善精神分裂症认知缺陷,其作用机制可能是通过减轻星形胶质细胞病理损伤,上调PSD-95、GAP-43、JIP-3、Cx-43表达,进而增强突触可塑性.