积雪草酸抑制TXNIP/NLRP3信号通路改善小鼠糖尿病肾病的机制研究

目的 基于TXNIP/NLRP3信号通路探讨积雪草酸(ASA)对糖尿病肾病小鼠的作用及机制.方法 将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组及积雪草酸低、中、高剂量组(10、20、40 mg-kg-1);采用高脂饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病肾病小鼠模型;造模成功后,按设定剂量灌胃给药,每日1次,连续8周.检测小鼠血糖、糖化血清蛋白水平,以及肾脏指数、24h尿量、血清肌酐及尿素氮等肾功能指标;采用HE、Masson染色法观察肾脏组织病理改变;ELISA法测定小鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的水平;免疫组织化学检测肾脏组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-cadherin、NLRP3 的表达;RT-qPCR 法检测肾脏组织 TNF-α、IL-1β、IL-18、α-SMA、E-cadherin mRNA表达水平;Western Blot法检测肾脏组织TXNIP、NLRP3、Cleaved Caspase-1蛋白表达水平.结果 与模型组比较,积雪草酸高剂量组小鼠的血糖水平显著降低(P＜0.01),但积雪草酸对小鼠的糖化血清蛋白水平影响不明显(P＞0.05);积雪草酸中、高剂量组小鼠的肾脏指数、24h尿量、血清肌酐及尿素氮水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01);积雪草酸中、高剂量组小鼠的肾小管损伤评分及胶原纤维阳性区域平均光密度值显著降低(P＜0.01),肾脏组织病理损伤有明显改善;积雪草酸中剂量组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-18水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),肾脏组织中的E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),α-SMA、NLRP3蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),TNF-α、IL-1β、IL-18、α-SMA mRNA 表达水平显著降低(P＜0.01),E-cadherin mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),TXNIP、NLRP3、Cleaved Caspase-1蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).结论 积雪草酸对糖尿病肾病小鼠的肾脏具有保护作用,可能与其抑制TXNIP/NLRP3信号通路所介导的炎症反应,并抑制α-SMA的表达改善肾脏的纤维化有关.