Runt相关转录因子1调控上皮间质转化在卷烟烟雾诱导的气道上皮细胞中的作用

目的 通过研究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)在经卷烟烟雾提取物(cigarette smoking extract,CSE)刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达,探讨RUNX1对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调控作用.方法 采用酶消化法提取大鼠的原代支气管上皮细胞,并用不同浓度的CSE进行刺激,采用CCK-8检测细胞的活性,探索合适的CSE处理浓度.用CSE处理细胞后,构建RUNX1干扰和过表达载体,转染入细胞,使RUNX1基因沉默或过表达,用免疫细胞化学法检测RUNX1蛋白的表达,用蛋白印迹法检测RUNX1、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、转录因子Snail、上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)以及间质细胞标志物波形蛋白(vimentin,VIM)的表达.结果 支气管上皮细胞的活力可被CSE降低,且降低程度与CSE的浓度成正比.通过CSE的诱导,原代大鼠支气管上皮细胞E-cad表达水平显著降低(P＜0.05),RUNX1、NF-κB、Snail、VIM的表达水平明显升高(均P＜0.05).干扰RUNX1基因后,E-cad表达上调(P＜0.05),NF-κB、Snail、VIM的表达下调(均P＜0.05).而过表达RUNX1后,E-cad的表达下调(P＜0.05),NF-κB、Snail、VIM的表达上调(均P＜0.05).结论 CSE可促进气道上皮细胞RUNX1的表达,RUNX1通过NF-KB/Snail通路调控EMT的进程.