去氢骆驼蓬碱对细粒棘球蚴的线粒体Drp1、Mfn2蛋白表达以及线粒体途径凋亡的影响

目的 探讨去氢骆驼蓬碱对细粒棘球蚴的线粒体Drp1、Mfn2蛋白表达以及线粒体途径凋亡的影响.方法 无菌采集细粒棘球蚴,随机分为空白对照组4个不同药物干预组.共干预5 d,采用亚甲蓝拒染试验观察细粒棘球蚴存活率,采用活性氧试剂盒检测ROS生成水平,结合Mito-Tracker Red CMXRos、Mito-Tracker Green荧光探针染色技术及JC-1染色技术综合检测线粒体膜电位和线粒体损伤情况,Western blot法检测细粒棘球蚴融合分裂蛋白Drp1、Mfn2、凋亡蛋白Bcl-2、Cyt-C表达水平变化.结果 与空白对照组相比,25 μg/mLABZSO组、25 μg/mLHM组、12.5μg/mLMdivi-1 组、HM:Mdivi-1 组(25 μg/mL:12.5 μg/mL)细粒棘球蚴平均存活率显著降低(P＜0.05 或 P＜0.01).与阳性药组相比,HM:Mdivi-1组(25μg/mL:12.5μg/mL)细粒棘球蚴平均存活率显著降低(P＜0.05).ROS试验显示,各干预组平均荧光强度与空白对照组相比均增强(均P＜0.01).Mito-Tracker Red CMXRos、Mito-Tracker Green试验显示,随着药物干预每组平均荧光强度均较空白对照组显著降低(均P＜0.01).JC-1染色显示,阳性对照组和药物组绿色荧光增强.Western blot显示,各给药组Drp1蛋白水平与空白对照组相比均呈上调趋势(均P＜0.01),Mdivi-1组呈下降趋势(P＜0.01);Mfn2蛋白均呈下调趋势(P＜0.05或P＜0.01);Cyt-C蛋白均呈上调趋势(P＜0.05或P＜0.01),Mdivi-1组呈下降趋势(P＜0.01);Bcl-2蛋白均呈下调趋势(均P＜0.01),Mdivi-1组呈上降趋势(P＜0.01).结论 去氢骆驼蓬碱通过线粒体途径使细粒棘球蚴凋亡,线粒体分裂蛋白Drp1和融合蛋白Mfn2的表达证实存在线粒体融合分裂机制.