ATF24多肽修饰的β-榄香烯脂质体联合顺铂对膀胱癌5637细胞的协同增效作用

目的 研究ATF24多肽修饰的β-榄香烯脂质体(ATF24-PEG-Lipo-β-E)联合顺铂(DDP)对膀胱癌5637细胞的协同增效作用.方法 通过免疫印迹法(Western blot)测定膀胱癌5637细胞中尿激酶纤溶酶原受体(uPAR)的表达;利用激光扫描共聚焦显微镜和高效液相色谱法(HPLC)研究ATF24 多肽修饰的脂质体的摄取情况;通过Transwell实验研究脂质体对5637细胞迁移和侵袭的影响;通过细胞计数-8(CCK-8)法、集落形成实验以及流式细胞术研究ATF24-PEG-Lipo-β-E联合DDP对5637细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响;通过Western blot测定凋亡相关蛋白剪切的聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(Cleaved PARP)和蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),以及周期相关蛋白细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)和细胞分裂周期蛋白25C(Cdc25C)的表达水平.结果 与RT4细胞和KU-19-19细胞相比,5637细胞高表达uPAR蛋白;细胞摄取定性和定量结果显示,ATF24多肽介导的脂质体相比于长循环脂质体对5637细胞具有更好的靶向性;Transwell实验结果显示,ATF24-PEG-Lipo-β-E能够通过靶向uPAR降低细胞迁移和侵袭;CCK-8实验和集落形成实验表明,ATF24-PEG-Lipo-β-E和DDP联用能够明显抑制5637细胞增殖;两药联用还能够通过上调Cleaved PARP蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达诱导5637细胞凋亡,以及通过下调Cyclin B1和Cdc25C蛋白的表达进一步阻滞细胞周期于G2/M期.结论 ATF24-PEG-Lipo-β-E和DDP联用对膀胱癌5637细胞具有协同增效作用.