一种大鼠心脏全器官灌注脱细胞方案及其脱细胞效果评价

目的 用一种新的灌注脱细胞方案对离体SD大鼠心脏进行脱细胞处理,对其脱细胞效果进行检测与评估.方法 取12只2月龄同窝雄性SD大鼠,按随机数字表法分为脱细胞组和对照组,每组6只.将各组大鼠麻醉并行全身肝素化后取出心脏.取脱细胞组心脏称取重量,然后将灌注针逆行插入升主动脉,连接好灌注装置进行脱细胞,观察脱细胞过程中心脏外观的变化,结束后称取脱细胞后的质量.在各心脏左心耳、右心耳、心尖部及右室流出道的同一部位取少量组织测定dsDNA含量,余组织制作石蜡切片并行HE染色及Masson染色后采集图像分析.结果 脱细胞过程中,心脏颜色逐渐变得淡红,再变得相对透明,最后变成乳白色,肉眼可见冠脉血管结构保存完好.脱细胞组脱细胞前后心脏质量分别为(1.27±0.03)g、(0.49±0.02)g,差异有统计学意义(t=111.164,P＜0.001).2组心脏各处测得的dsDNA含量差异均有统计学意义(均P＜0.01),且脱细胞组各处测得的dsDNA含量均显著低于50 ng/mg.对照组心脏HE染色切片及Masson染色切片均可见典型的心肌组织切片图像.而脱细胞组HE染色切片及Masson染色切片图像呈网状,均无明显细胞及核结构,其内可见冠状动脉轮廓.结论 该脱细胞方案操作简单,效果可靠,是一种较为理想的心脏全器官脱细胞生物支架制备方案.