参苓白术散对大肠癌移植瘤模型小鼠化学疗法后肠道黏膜屏障的影响
Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine(2023)
Abstract
目的 观察参苓白术散对大肠癌移植瘤模型小鼠化学疗法(简称"化疗")后肠道黏膜屏障的作用效果.方法 将32只SPF级BALB/c小鼠皮下接种CT26肠癌细胞,成瘤后随机分为模型组、奥沙利铂组、参苓白术散组、参苓白术散联合奥沙利铂组,每组8只.模型组予蒸馏水灌胃(0.2 mL/次,1次/d),奥沙利铂组予奥沙利铂5 mg/kg腹腔注射(0.2 mL/次,每3天1次),参苓白术散组15.6 g/kg灌胃(0.2 mL/次,1次/d),参苓白术散联合奥沙利铂组予参苓白术散15.6 g/kg灌胃(0.2 mL/次,1次/d)联合奥沙利铂5 mg/kg腹腔注射(0.2 mL/次,每3天1次),共治疗18 d.治疗结束后每组选取8只小鼠采集血清,以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、白介素-17(IL-17)以及肠道黏膜中肠碱性磷酸酶(IAP)、肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA);剥取小鼠瘤体、脾脏并称重,通过苏木素-伊红(HE)染色法和免疫组织化学(IHC)染色法在组织形态学上分析参苓白术散对小鼠肠道黏膜的影响,并通过流式细胞术检测肿瘤组织中免疫微环境的变化情况.结果 与模型组比较,参苓白术散组、奥沙利铂组以及参苓白术散联合奥沙利铂组均能抑制肿瘤的生长,其中参苓白术散联合奥沙利铂能显著抑制肿瘤的生长(P<0.05);奥沙利铂单独治疗能显著降低肠IAP的表达(P<0.05),同时可以显著升高D-LA(P<0.05)和DAO的表达水平(P<0.05).HE染色结果表明,参苓白术散可以显著修复化疗之后结肠绒毛的组织学排列,并且减少炎症反应发生.IHC染色结果表明,参苓白术散能显著提高化疗后小鼠结肠紧密连接蛋白闭合蛋白(claudin)、咬合蛋白(occludin)和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)的表达水平.和奥沙利铂相比,参苓白术散联合奥沙利铂能缓解肠道黏膜的屏障损伤,一定程度修复化疗引起的肠道黏膜屏障损伤.另一方面,参苓白术散能增加肿瘤微环境中CD8+T细胞的浸润.结论 参苓白术散能够保护化疗后肠黏膜屏障,改善肿瘤免疫微环境,从而抑制小鼠皮下移植瘤的生长.
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Key words
colorectal cancer,Chinese classic formulas,intestinal mucosal barrier,tumor microenvironment,chemotherapy,mouse model,traditional Chinese herbal medicine research
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