大鼠成骨细胞膜片的体外构建及成骨潜力评估

目的 体外构建大鼠成骨细胞膜片,并评估其成骨潜力.方法 原代培养大鼠成骨细胞鉴定后,高密度连续培养,在维生素C诱导下形成细胞膜片.用扫描电镜观察膜片形貌特征及细胞形态;行碱性磷酸酶(ALP)活性检测;实时荧光定量PCR检测其成骨相关基因I型胶原(COLⅠ)、骨钙素(OC)的表达情况.结果 维生素C诱导高密度连续培养成骨细胞5d能获得可机械刮起的成骨细胞膜片.电镜下,由多层细胞组成膜片,细胞层之间有间隙.ALP含量实验组高于对照组,第2周低于第1周.实验组I型胶原mRNA表达情况,第1周与对照组无差异,第2周与第3周高于对照组;实验组内,第1周与第2周无差异,第3周下调.骨钙素mRNA表达,实验组高于对照组;实验组内,表达量随培养时间延长而上调.结论 维生素C促进连续培养的成骨细胞形成膜片,机械刮取法能够完整获得.形成的细胞膜片2周内可能生存力较强,可能具备一定成骨潜能.