鹅星状病毒鹅细小病毒和鹅坦布苏病毒三重PCR检测方法的建立与应用

为建立一种可同时检测鹅星状病毒(GoAstV)、鹅细小病毒(GPV)和鹅坦布苏病毒(TMUV)的方法,根据GenBank上公布的GoAstV、GPV和TMUV的保守基因序列设计3对特异性引物,通过优化反应条件和反应体系,建立了能够同时检测GoAstV、GPV和TMUV的三重PCR方法,并初步应用于临床.结果显示:所建立的三重PCR检测方法能特异性扩增GoAstV、GPV和TMUV三种病毒的目的片段,对鹅副黏病毒、禽流感病毒、禽腺病毒和鹅圆环病毒的检测结果均为阴性,对GoAstV、GPV和TMUV的最低检出浓度分别为1.26×105、1.26×103和1.26×105 copies/μL.利用三重PCR和单项PCR方法同时对黑龙江省部分鹅场的32份临床样品进行检测,3种病毒的阳性检出率分别为56.25％、6.25％和6.25％,2种方法的检测结果一致.结果表明,本试验中建立的三重PCR检测方法快捷、敏感、特异,能够用于GoAstV、GPV和TMUV的流行病学调查和临床检测.