H7N9亚型流感病毒特异性中和抗体的筛选及其表位的鉴定

Chinese Veterinary Science(2023)

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Abstract
为了获得H7N9亚型流感病毒的中和抗体以及鉴定新的中和表位,以原核表达的H7N9亚型流感病毒SZ19毒株血凝素蛋白HA1亚基作为免疫原,通过杂交瘤细胞技术,构建筛选得到4株单克隆抗体杂交瘤细胞株2B2B3、3C5D6、4E12D6、9F10G3;将杂交瘤细胞扩大培养后,注射免疫6周龄雌性BALB/c小鼠腹腔,制备获得4株单克隆抗体;对制备的4株单克隆抗体的特异性、ELISA效价、中和活性等生物活性进行鉴定与筛选.结果表明,筛选获得1株能够特异性识别H7N9亚型流感病毒HA蛋白的中和单克隆抗体2B2B3,其半数抑制浓度(IC50)为67.8 ng/μL,ELISA效价为4 096,为具有κ轻链的IgG2b亚类,并通过肽扫描技术鉴定出H7N9亚型流感病毒HA蛋白高度保守的中和表位115ALRQILRESGGIDKEA130.
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