葡萄VvSUC12基因启动子的克隆及上游调控因子鉴定

WU Jiahong,XING Qikai,ZHOU Yueyan,BAI Qingrong

Acta Phytopathologica Sinica（2023）

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摘要

枝干病害葡萄溃疡病近年来严重限制了葡萄产业发展.研究表明葡萄蔗糖转运蛋白参与寄主植物和病原菌的互作过程.为解析蔗糖转运蛋白VvSUC12在葡萄免疫反应过程中的功能,本研究克隆了 VvSUC12基因翻译起始位点上游1 500 bp的启动子区,通过生物信息学分析发现该区域包含4个Dof转录因子结合序列(A/TAAAG)及多种激素调节与防御相关的顺式元件.实时荧光定量分析显示,接种可可毛色二孢菌显著诱导VvSUC12和VvDof19基因的表达.通过酵母单杂交实验筛选得到与VvSUC12启动子互作的转录因子VvDof19.酵母双杂交实验证实VvDof19具有自激活活性;进一步通过烟草瞬时表达发现Dof19-GFP的相对GUS活性约为对照GFP的9倍,表明转录因子VvDof19能够激活VvSUC12基因的表达.研究结果为深入研究蔗糖转运蛋白在葡萄免疫反应中的功能奠定基础.

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关键词

Vitis vinifera,Botryosphaeria dieback,yeast one-hybrid,sucrose transporters,Dof transcription factor

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