兔出血症病毒VP60截短基因原核表达及诱导条件优化

兔瘟是由兔出血症病毒(RHDV)引起的传染病,给肉兔养殖产业带来巨大损失.根据RHDV VP60基因序列进行抗原肽分析,选择该基因主要抗原肽段后,设计一对特异性引物进行PCR扩增,并插入pET32a(+)载体中构建重组质粒.经PCR鉴定、酶切鉴定和测序,结果表明pET32a(+)-VP60截短基因质粒构建成功.对RHDV-VP60截短基因蛋白原核表达系统筛选诱导条件,结果表明:IPTG浓度为0.8 mmoL/L,诱导时间为8 h,诱导温度为37℃,表达量最高.研究为后续兔瘟亚单位疫苗和诊断试剂的研究奠定基础.