tva受体基因起始密码子突变对鸡感染A亚群禽白血病病毒的影响

[目的]探索tva受体基因起始密码子突变(tva c.3G>A)对鸡感染A亚群禽白血病病毒(Avian leukemia virus subgroup A,ALV-A)的影响.[方法]利用Sanger测序和RT-PCR验证我国黄羽肉鸡存在tva c.3G>A突变.利用流式细胞术检测tvac.3G>A突变对鸡体外感染RCASBP(A)-GFP荧光报告病毒的影响.通过ALV-A体内攻毒试验,探究tvac.3G>A突变对鸡体内感染ALV-A的影响.利用直接测序方法对我国黄羽肉鸡品系tva c.3G>A突变位点进行基因分型.[结果]Sanger测序和RT-PCR结果鉴定我国黄羽肉鸡品系tva基因编码区第3 位碱基由G突变为A,该突变引起tva基因起始密码子序列由ATG突变为ATA.流式细胞术检测结果显示野生型tvac.3G/G鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)对RCASBP(A)-GFP易感,纯合突变型tva c.3A/A CEF抗RCASBP(A)-GFP感染,表明tva c.3G>A突变导致鸡体外抗RCASBP(A)-GFP的感染.ALV-A体内攻毒试验的结果表明,tvac.3G>A突变导致鸡体内抗ALV-A的感染.tvac.3G>A突变位点基因分型发现,CB01、CB08、CB10 和CB15 品系存在纯合抗性基因型tva c.3A/A,频率分别为 0.10、0.15、0.23 和 0.08.[结论]tva c.3G>A突变引起鸡在体外、体内抗ALV-A感染,tva c.3G>A突变位点可作为ALV-A的遗传抗性位点.