miR-30a-3p通过靶向调控BAFF在肾癌细胞迁移和血管生成能力中的作用研究

目的:研究微小RNA(miR)-30a-3p对肾细胞癌(RCC)细胞的转移和血管生成表型的影响.方法:结合癌症基因组图谱(TCGA)数据库提供的RCC中miR-30a-3p表达数据分析miR-30a-3p在RCC细胞系中的表达特征.结合生物信息学网站预测miR-30a-3p与B细胞激活因子(BAFF)3'非翻译区(3'-UTR)的结合.将RCC细胞系ACHN和786O分为LV-miR-30a-3p组[感染过表达miR-30a-3p的慢病毒载体]、LV-NC组[感染慢病毒载体阴性对照]、LV-miR-30a-3p+pcDNA-BAFF组[联合感染LV-miR-30a-3p和过表达BAFF的载体(pcDNA-BAFF)]以及LV-miR-30a-3p+pcDNA-EV组[联合感染LV-miR-30a-3p和空载体(pcDNA-EV)].Transwell迁移小室法检测细胞的迁移能力,小管形成实验检测细胞血管生成能力.qPCR检测miR-30a-3p的表达.Western blot检测BAFF、促血管生成蛋白血管内皮生长因子A(VEGFA)的蛋白表达.双荧光素酶基因报告实验检测ACHN细胞中的miR-30a-3p对BAFF的靶向调控作用.结果:分析TCGA数据库中数据,与Normal组比,Canc-er组的miR-30a-3p表达都显著降低(P<0.05);与HK-2细胞比,ACHN和786O细胞系中miR-30a-3p的表达都明显降低(均P<0.05).与LV-NC组比,LV-miR-30a-3p组miR-30a-3p表达增加(均P<0.05),LV-miR-30a-3p组的细胞迁移、小管生成、及BAFF和VEGFA表达均下调(均P<0.05).经过生物信息学预测以及双荧光素酶报告基因实验验证发现BAFF是miR-30a-3p的靶基因.与LV-miR-30a-3p+pcDNA-EV组比较,LV-miR-30a-3p+pcDNA-BAFF组的细胞迁移、小管生成率及BAFF表达均上调(均P<0.05).结论:miR-30a-3p通过靶向抑制BAFF抑制RCC细胞的迁移和血管生成能力.