芝麻酚通过AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路调控食管鳞状细胞癌Eca109细胞的自噬和凋亡

目的:探讨芝麻酚(SEM)通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)通路影响食管鳞状细胞癌(ESCC)Eca109细胞自噬和凋亡的机制.方法:用不同浓度的SEM(0、1.562 5、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200、400 μmol/L)分别处理Eca109细胞、人食管上皮细胞HEEpiC48h,CCK-8法检测细胞增殖率,筛选适宜的SEM浓度用于后续实验.将Eca109细胞分为对照组(CK组,0 μmol/L)、低剂量SEM组(SEM-L组,25 μmol/L)、中剂量SEM组(SEM-M组,50 pmol/L)、高剂量 SEM 组(SEM-H 组,100 μmol/L)、高剂量 SEM+Compound C(AMPK抑制剂)组(SEM-H+Compound C组,100 μmol/L+10 pmol/L),所有各组Eca109细胞在对应的药物浓度下处理48 h后,CCK-8法检测Eca109细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,透射电镜观察Eca109细胞内自噬小体,WB法检测Eca109细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-l、B淋巴细胞瘤2(Bc12)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、p-AMPK、SIRT1、p-NF-κBp65的表达.结果:通过预实验选择SEM实验浓度为25、50、100 pmol/L用于正式研究.在SEM处理下,与CK组比较,SEM-L组、SEM-M组、SEM-H组Eca109细胞的增殖水平(24、48 h)和Bc12、p-NF-κBp65蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率和自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、BAX、p-AMPK、SIRT1蛋白表达显著升高,且呈剂量依赖性(均P＜0.05);与SEM-H组比较,SEM-H+Compound C组Eca109细胞增殖水平(24、48 h)和Bc12、p-NF-κBp65蛋白表达均显著升高,细胞凋亡率和自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、BAX、p-AMPK、SIRT1蛋白表达均显著降低(均P＜0.05).结论:SEM可能通过激活AMPK/SIRT1信号通路而抑制NF-κB活性来促进Eca109细胞自噬与凋亡.