聚乙二醇修饰的脂质体四价流感疫苗稳定性

目的:通过影响因素实验、加速实验考察聚乙二醇(PEG)修饰的脂质体流感疫苗冻干粉的物理和生物稳定性,并预测其有效期.方法:(40±2)℃下进行高温影响因素实验,4℃,(25±2)℃下进行加速实验.以外观性状、粒径、包封率、稳定系数作为物理稳定性评价指标;采用脾淋巴细胞增殖实验和血凝抑制实验以刺激指数(SI)和免后与免前抗体滴度比(HI)作为指标考察生物稳定性.采用经典恒温法,利用Arrhenius公式计算有效期.结果:影响因素实验:PEG2000(3000/6000)修饰的脂质体流感疫苗冻干粉于(40±2)℃下放置20 d,粒径和稳定系数逐渐增大,包封率逐渐下降;放置10 d时,各PEG组SI值比原液组大,与原液组比较差异有统计学意义(P<0.05);各PEG组免后与免前抗体滴度比均>4;放置20 d时,各PEG组SI值比原液组小,与原液组比较有显著性差异(P<0.05);且各PEG组免后与免前抗体滴度比均<4.加速实验:3批PEG6000修饰的脂质体流感疫苗冻干粉在4℃和(25±2)℃下放置3个月,4℃下粒径、包封率、稳定系数基本不变,(25±2)℃下粒径和稳定系数增大,包封率下降;4℃下PEG6000组SI值与原液组比较有显著性差异(P<0.05);(25±2)℃下PEG6000组SI值与原液组比较均无显著性差异;4℃和(25±2)℃PEG6000组免后与免前抗体滴度比均≥4.有效期预测:25℃,30℃,35℃,40℃的降解速率常数(K)分别为1.039×10-3,2.649×10-3,3.574×10-3,4.868×10-3 d-1,lnK对1/T进行线性回归,回归方程为:lnK=20.195-8148.5/T(r=0.9179).结论:PEG修饰的脂质体流感疫苗冻干粉在(40±2)℃下放置10 d,PEG6000修饰的脂质体流感疫苗冻干粉在4℃和(25±2)℃下放置3个月都具有良好稳定性;通过推算PEG6000修饰的脂质体流感疫苗在4℃,25℃,37℃下分别大约能储存2.2年、3.3月、24 d.