环磷酰胺诱导生精障碍小鼠模型不同恢复期的比较研究

目的 比较并评价环磷酰胺造模后不同恢复期小鼠生精障碍的改善程度.方法 将48只4～5周龄体质量为18～20 g的ICR雄性小鼠随机分为3个对照组和3个模型组,每组8只.3个模型组的每只小鼠于实验第1～7天连续腹腔注射环磷酰胺60 mg/kg,处理结束后分别继续饲养7 d、14 d和21 d.每个模型组均设相应的对照组,3个对照组小鼠腹腔注射对应体积的生理盐水.各组小鼠在相应时间点通过眼眶静脉采血后处死,取睾丸、附睾和精囊,称重后计算其生殖器官指数.HE染色后比较睾丸和附睾组织病理学变化,精子质量分析测定精子相关指标.ELISA法及相关试剂盒检测血清生殖激素含量、睾丸氧化应激水平和睾丸标志性酶活性变化.结果 与对照组相比,环磷酰胺处理结束后7 d、14 d和21 d的模型组小鼠睾丸指数均明显下降(P<0.01),7 d、14 d的附睾指数和7 d、21 d的精囊指数明显下降(P<0.05);且随着时间延长,模型组睾丸和附睾组织病理学损伤逐渐减轻.环磷酰胺处理结束后7 d、14 d的模型组精子数量明显减少(P<0.01),血清睾酮水平降低(P<0.05),睾丸中丙二醛含量明显增多(P<0.01),还原型谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶含量明显降低(P<0.05),睾丸标志性酶乳酸脱氢酶活力明显下降(P<0.05),γ-谷氨酰转肽酶活力明显上升(P<0.05);其中7 d的模型组小鼠精子活力明显下降(P<0.001),精子畸形率明显上升(P<0.05),血清促卵泡素和促黄体生成素明显增加(P<0.01).21 d的模型组小鼠精子相关指标、血清生殖激素水平、睾丸氧化应激水平和睾丸标志性酶活性变化均不明显(均P＞0.05).结论 环磷酰胺60 mg/kg连续腹腔注射7 d,注射结束后7 d所致小鼠生殖毒性较为明显,能够构建较理想的小鼠生精障碍模型;而随着恢复期的延长,至环磷酰胺处理结束后21 d小鼠生精障碍各项指标逐渐恢复,接近正常水平.