健脾化瘀解毒方调控PI3K/AMPK-mTOR-ULK1抑制ROS诱导GPL细胞自噬的机制研究

目的:探讨健脾化瘀解毒方通过抑制氧化应激所致胃癌前病变(GPL)大鼠胃黏膜上皮细胞(GECs)自噬,保护胃黏膜、防治癌变的机制.方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、维酶素组、健脾化瘀解毒方高剂量组和健脾化瘀解毒方低剂量组,复制GPL大鼠模型,于造模第12 w连续灌胃给药10 w,实验结束时麻醉大鼠后,取血分离血清测ROS、SOD、MDA;取胃窦部胃黏膜,观察组织病理学(HE)和肠上皮化生(AB-PAS染色),测GECs的PI3K、mTOR、AMPK、Raptor、ULK1、ATG13、Beclin1、ATG4B mRNA 及 miR182、miR30a、miR206 和 Beclin1、HMGB1、ATG5、MUC2、CDX2、ATG2B蛋白表达.结果:正常对照组大鼠胃黏膜无异常,模型组大鼠胃黏膜萎缩,空泡样变、组织异型性变,异型增生灶占胃黏膜厚度的1/3,各给药组胃黏膜病理学改变不同程度减轻;模型组ROS较正常对照组显著升高(P＜0.01);与模型组比较,健脾化瘀解毒方组PI3K、mTOR mRNA及miR30a、miR206显著升高,而AMPK、Raptor、ULK1、ATG13、Beclin1、ATG4B mRNA 及 miR182 和 Beclin1、HMGB1、ATG5、MUC2、CDX2 蛋白表达显著降低(P＜0.01).结论:健脾化瘀解毒方可通过影响miR182、miR30a、miR206等miRNAs活化,调控PI3K/AMPK-mTOR-ULK1通路,从而抑制氧化应激诱导自噬,逆转GPL大鼠GECs的肠化和损伤,防止GPL癌变.