Mechanism of Xinmaikang Recipe(心脉康方)Suppresses Pyroptosis Pathway TLR4/NLRP3 to Prevent and Treat Atherosclerosis

目的:探讨心脉康方治疗动脉粥样硬化(AS)的可能分子作用机制.方法:将46只ApoE-/-小鼠进行8周高脂饲料连续喂养复制小鼠动脉粥样硬化模型,10只C57BL/6小鼠同时使用普通饲料喂养,8周后取6只ApoE-/-小鼠验证造模成功后,将剩余40只小鼠按随机数字表法分为模型组、阿托伐他汀组、心脉康方低剂量组、心脉康方高剂量组,每组10只.10只C57BL/6小鼠作为空白对照组.各药物干预组小鼠给予相应的药物干预,空白对照组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃.12周后,采用苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察主动脉组织病理学形态改变;采用ELISA法检测血清中ox-LDL、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-18的水平;采用全自动生化仪检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;采用qPCR检测主动脉组织中易损斑块稳定性指标(ICAM-1 mRNA、VCAM-1 mRNA、MMP-9 mRNA、MCP-1 mRNA)及细胞焦亡相关指标(IL-1β mRNA、IL-18 mRNA、TLR4 mRNA、NLRP3 mRNA、Caspase-1)水平;采用 Western blotting检测 ICAM-1、VCAM-1、MMP-9、MCP-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N、TLR4、NLRP3、Caspase-1 蛋白相对表达情况.结果:与空白对照组比较,模型组小鼠主动脉血管壁增厚,有大量斑块和脂质沉淀等病变,血清中TC、TG、LDL-C含量及ox-LDL、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18水平明显升高(P＜0.01),而HDL-C水平明显降低(P＜0.01),同时主动脉组织中的ICAM-1、VCAM-1、MMP-9、MCP-1、IL-18、IL-1β、GSDMD-N、TLR4、NLRP3和Caspase-1 蛋白和 mRNA 相 对表达量明显升高(P＜0.01).与模型组比较,阿托伐他汀组和心脉康方高剂量组小鼠主动脉组织内脂滴和易损斑块面积均减少,血清 中TC、TG、LDL-C含量及ox-LDL、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18水平均降低(P＜0.01),而 HDL-C 水平明显升高(P＜0.01),主动脉组织中的 ICAM-1、VCAM-1、MMP-9、MCP-1、IL-18、IL-1β、GSDMD-N、TLR4、NLRP3 和 Caspase-1蛋白和mRNA相对表达量均明显降低(P＜0.01).结论:心脉康方可能通过调控TLR4/NLRP3通路影响炎症反应和细胞焦亡,从而改善动脉粥样硬化.