放射诱导的多倍体结肠癌SW1116细胞及其子代细胞增殖、侵袭和迁移能力的改变及相关机制研究
Cancer Research and Clinic(2023)
Abstract
目的:探讨放射诱导的多倍体结肠癌SW1116细胞及其子代细胞增殖、迁移和侵袭的相关特性。方法:采用含10%胎牛血清的Leibovitz's L-15培养液常规培养结肠癌SW1116细胞。采用7 Gy X线照射对数生长期的SW1116细胞,分别在放射诱导后第3、5、10、19天用倒置显微镜观察细胞形态变化。根据细胞形态变化,将放射诱导后第3天的细胞为多倍体肿瘤细胞(PGCC)组,以第19天的细胞为PGCC子代组,以未经放射诱导的SW1116细胞作为对照组。采用流式细胞术检测对照组、PGCC组、PGCC子代组细胞倍性,CCK-8法检测3组细胞增殖能力,分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测3组细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法检测3组细胞周期、增殖相关蛋白和上皮间质转化(EMT)相关标志物N-钙黏蛋白(N-cad)的表达情况。结果:在放射诱导后第3、5、10天SW1116细胞体积逐渐变大,在第19天细胞体积恢复正常。对照组、PGCC组、PGCC子代组的多倍体(DNA含量>4N)细胞亚群比例分别为(2.3±1.1)%、(23.1±8.1)%、(3.2±0.5)%,差异有统计学意义( F=18.52, P<0.05),其中,PGCC组多倍体细胞亚群比例高于对照组( t=5.38, P<0.01),PGCC子代组多倍体细胞亚群比例与对照组间差异无统计学意义( t=0.22, P>0.05)。培养72 h后,对照组、PGCC组、PGCC子代组细胞增殖率分别为(100.0±4.1)%、(73.5±0.7)%、(123.9±3.5)%,差异有统计学意义( F=190.27, P<0.001)。细胞划痕48 h后,对照组、PGCC组、PGCC子代组划痕愈合率分别为(38.0±2.7)%、(41.5±4.0)%、(63.7±4.2)%,差异有统计学意义( F=43.05, P<0.001)。培养24 h后,对照组、PGCC组、PGCC子代组侵袭细胞数分别为(12.9±1.2)个、(3.4±0.6)个、(23.7±1.5)个,差异有统计学意义( F=63.64, P<0.001)。PGCC组中细胞周期相关蛋白P-cdc25c、cdc25c、cdc2相对表达量均低于对照组(均 P<0.05),转录因子相关蛋白E2F-2、E2F-3和EMT标志物N-cad相对表达量亦均较对照组下调( P<0.05);PGCC子代组中P-cdc25c、cdc25c、cdc2、E2F-2、E2F-3、N-cad蛋白相对表达量均高于对照组(均 P<0.05)。 结论:放射线能够诱导结肠癌SW1116细胞产生多倍体,可能再经不对称有丝分裂产生子代细胞并获得新生,进而促进结肠癌的复发和转移。
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Key words
Colonic neoplasms,Cell proliferation,Cell movement,Neoplasm invasiveness,Polyploidy,Epithelial-mesenchymal transition
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