植物乳杆菌WCFS1对急性坏死性胰腺炎小鼠胰腺及回肠损伤的影响

目的:探讨益生菌植物乳杆菌WCFS1(LP)灌胃对急性坏死性胰腺炎(ANP)小鼠胰腺及回肠损伤的影响。方法:24只健康雄性小鼠应用广谱抗生素持续灌胃3周以建立肠道无菌鼠，然后随机分为正常对照组(CON组)、ANP模型组(ANP组)、LP灌胃组(LP组)和LP灌胃后再诱导ANP组(LP+ANP组)，每组6只。LP组与LP+ANP组给予1×10 9 CFU/ml、0.2 ml/d的LP灌胃1周，CON组与ANP组以0.2 ml/d无菌磷酸盐缓冲液灌胃1周。采用雨蛙肽(100 μg/kg)腹腔注射10次，每次间隔1 h，第10次注射时腹腔加注脂多糖5 mg/kg的方法构建ANP小鼠模型，2 h后处死小鼠。采用荧光定量PCR法检测小鼠粪便及回肠黏膜中LP数量；取胰腺和回肠组织行病理学检查，观察组织的炎症程度，并行病理学评分；采用酶动力化学法检测血清淀粉酶水平，ELISA法检测血清炎症因子水平及肠通透性指标；荧光定量PCR法检测胰腺与回肠组织炎症因子的表达；免疫荧光组织化学法检测回肠紧密连接蛋白occludin、claudin-1、ZO-1表达量。 结果:LP灌胃后小鼠粪便及回肠黏膜LP水平显著升高，差异有统计学意义(913.30±39.12比2.39±1.39，23.11±0.50比1.38±0.28， P值均<0.05)。CON组、LP组、ANP组、LP+ANP组胰腺病理评分分别为(0.26±0.41)、(0.17±0.26)、(8.55±0.46)、(6.30±0.45)分；血清淀粉酶水平分别为(219.70±19.73)、(217.60±11.30)、(2896.24±98.32)、(1837.13±131.60)U/L，IL-1β水平分别为(0.87±0.28)、(1.4±0.85)、(67.41±6.45)、(36.33±5.65)pg/ml，IL-6分别为(0.74±0.27)、(0.16±0.16)、(280586.12±39163.92)、(107912.75±31283.47)pg/ml，IL-10分别为(35.52±5.27)、(50.99±15.34)、(2008.45±184.83)、(3070.35±403.71)pg/ml；胰腺组织IL-1β mRNA表达量分别为1.42±0.39、0.95±25、20.53±0.50、10.69±1.01，IL-6 mRNA分别为1.31±0.44、0.93±0.02、21.97±1.71、11.54±1.75，IL-10 mRNA分别为0.93±0.14、0.75±0.15、0.99±0.21、1.76±0.19。LP组与CON组差异均无统计学意义，LP+ANP组胰腺病理评分，血清淀粉酶、IL-1β、IL-6水平，胰腺组织IL-1β、IL-6 mRNA表达量均较ANP组显著下降，而血清IL-10水平及胰腺组织IL-10 mRNA表达量较ANP组显著升高，差异有统计学意义( P值均<0.05)。CON组、LP组、ANP组、LP+ANP组回肠病理评分分别为0、0、(3.17±0.41)、(1.67±0.52)分；血清DAO水平分别为(0.03±0.03)、(0.02±0.02)、(0.50±0.05)、(0.49±0.06)ng/ml，LPS水平分别为(2.75±0.35)、(3.74±0.28)、(7.19±0.92)、(5.88±0.38)ng/ml；回肠组织IL-1β mRNA表达量分别为1.21±0.20、1.17±0.09、1.81±0.25、1.63±0.21，IL-6 mRNA分别为1.01±0.29、2.83±0.42、54.45±8.50、16.87±4.42，IL-10 mRNA分别为1.12±0.41、6.09±2.51、11.65±1.47、29.86±2.93。LP组回肠组织IL-10 mRNA表达量较CON组显著升高，其他指标两组差异均无统计学意义。LP+ANP组回肠病理评分、血清LPS水平、回肠组织IL-6 mRNA表达量均较ANP组显著下降，而IL-10 mRNA水平较ANP组显著升高；回肠紧密连接蛋白occludin、claudin-1、ZO-1表达量较ANP组显著增加，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。 结论:LP灌胃可减轻雨蛙肽诱导的ANP小鼠的胰腺及回肠屏障的损伤程度。